- 脂肪组织切片制备方法的改进
脂肪组织包括白色脂肪组织和棕色脂肪组织,白色脂肪组织和棕色脂肪组织在能量代谢中发挥着截然相反的作用。白色脂肪组织主要通过甘油三酯储存能量,而棕色脂肪组织则通过产热消耗能量。近年来科学家们越来越重视对脂肪组织的研究。脂肪组织结构特殊,含有较多的油脂成分,无论是冰冻切片还是石蜡包埋制片都较其它组织困难,传统的处理方法往往不能制备出完整的切片,影响对其组织结构的观察,对后续研究造成困难,为了解决这一问题,中国医学科学院实验病理分析平台科研人员不断摸索,对脂肪组织石蜡切片和冰冻切片进行了改进。提高了脂肪组织的制片质量。文章发表在《中国比较医学杂志》2017年第一期。
制备石蜡切片
取脂肪组织迅速固定于10%中性福尔马林中,设置不同的脱水程序(表1)制备石蜡切片,HE染色(图1,图2)。免疫组化法观察PPARγ和ITLN1的表达(图3)。
制备冰冻切片
若研究脂滴,先取脂肪组织迅速固定于甲醛钙或10%中性福尔马林固定液中24 h以上,OCT包埋,置于-80℃冰箱至少30 min,设置冰冻切片机箱体温度-20℃,样品头温度-30℃,切片后再用冷甲醛钙固定15min后放-20℃备用。若不研究脂滴,仅需要在10%中性福尔马林中固定即可,切片再用冷丙酮固定15min后放-20℃保存备用。石蜡切片与冰冻切片HE染色比较见图4。
改进的脂肪组织石蜡切片和冰冻切片均可成功应用于不同实验动物,为脂肪组织的研究提供了有力的支撑条件。
文章来源
徐玉环,徐艳峰,刘颖,黄澜,于品,韩云林,李彦红,赵文杰,邓巍,秦川,朱华.脂肪组织切片制备方法的改进. 中国比较医学杂志,2017,27(1):79-84